Evidence of Borrelia in wild and domestic mammals from the state of Minas Gerais, Brazil / Evidência de Borrelia em mamíferos silvestres e domésticos no Estado de Minas Gerais, Brasil

The main of the study was to evaluate the presence of Borrelia burgdorferi infection in domestic and wild vertebrates and ectoparasites in endemic areas from the state of Minas Gerais, Brazil. A total of 445 serum samples were examined by ELISA, which used the Borrelia burgdorferi strain G39/40 U.S. source and 3,821 tick samples were tested by polymerase chain reaction (PCR). B. burgdorferi antibodies were found in 30 serum samples (6.74%); three in marsupials (7.69%), three in rodents (2.80%), nine in dogs (6.25%), and 15 in horses (9.68%). Nested-PCR performed in DNA samples obtained from collected ticks demonstrated negative results. Although attempts to amplify B. burgdorferi DNA from ticks had been not successful, the presence of seroreactive vertebrates suggests the possibility the Borrelia species circulating in these regions. Further research is required to provide information on the presence of Borrelia in Brazilian territory and its association with Baggio-Yoshinari syndrome.

O principal objetivo do estudo foi avaliar a presença de infecção por Borrelia burgdorferi em vertebrados domésticos e silvestres e ectoparasitas em áreas endêmicas do estado de Minas Gerais, Brasil. Um total de 445 amostras de soro foram examinadas por ELISA, onde usou-se a cepa americana G39/40 de Borrelia burgdorferi e 3.821 amostras de carrapatos foram testados pela reação em cadeia da polimerase (PCR). Anticorpos anti -B. burgdorferi foram encontrados em 30 amostras de soro (6,74%); três marsupiais (7,69%), três em roedores (2,80%), em nove cães (6,25%) e 15 em cavalos (9,68%). Nested-PCR realizada em amostras de DNA obtidas a partir de carrapatos coletados demonstraram resultados negativos. Apesar das tentativas para amplificar o DNA de B. burgdorferi a partir de carrapatos não tenha sido bem sucedido, a presença de soroatividade em vertebrados sugere a possibilidade de espécies de Borrelia circulando nestas regiões. Mais pesquisas são necessárias para fornecer informações sobre a presença de Borrelia em território brasileiro e sua associação com a Síndrome de Baggio-Yoshinari.

Identificação do agente etiológico da Doença de Lyme-símile brasileira (Síndrome Baggio-Yoshinari) / Identification of the causative agent of Brazilian Lyme diseaselike illness (Baggio-Yoshinari Syndrome)

A Doença de Lyme-símile brasileira ou Síndrome Baggio-Yoshinari (SBY) é uma zoonose emergente, transmitida por carrapatos e até o momento, de descrição restrita ao território brasileiro. O agente etiológico da SBY era desconhecido até o presente trabalho. O objetivo principal do estudo foi identificar a etiologia da SBY. Foi selecionado 2 grupos de pacientes: grupo A (n=68) composto por pacientes com suspeita diagnóstica de SBY, a maioria na fase latente da doença; grupo B (n=10), composto por pacientes com diagnóstico de SBY, que apresentaram obrigatoriamente eritema migratório e que encontravam-se sintomáticos no momento da coleta. Foi utilizado também um grupo controle composto por indivíduos saudáveis e com epidemiologia negativa (n=50). Amostras de sangue foram coletadas para a realização de sorologias, culturas, análises microscópicas (óptica e eletrônica) e reação de cadeia da polimerase (PCR) para diferentes micro-organismos (Mycoplasma spp, Chlamydia spp e Borrelia spp). Além disso, foi realizado um estudo preliminar, através da PCR para Borrelia spp em 47 amostras de carrapatos oriundos de áreas de risco do Espírito Santo (sendo 17 Rhipicephalus microplus e 30 Rhipicephalus sanguineus), e amostras de sangue total de 27 bovinos e 26 equinos, animais estes oriundos da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. Os resultados mostraram que a SBY não se trata de uma zoonose causada por um conjunto de micro-organismos como pensado inicialmente e sim pela Borrelia burgdorferi sensu lato. Descoberta essa que foi possível empregando-se novos primers amplificadores do principal gene envolvido na síntese do gancho flagelar da Borrelia, chamado flgE...

Brazilian Lyme disease-like illness (BLDL) or Baggio-Yoshinari Syndrome (BYS) is an emerging zoonosis, transmitted by ticks and so far, restricted to the description of the Brazilian territory. The causative agent of BYS was unknown until now. The main objective of this study was to identify the etiology of BYS. We have selected two groups of patients: group A (n = 68) consisting of patients suspected of BYS, mostly in the latent stage of disease; group B (n = 10), composed of patients diagnosed with BYS, who had compulsorily erythema migrans and that were symptomatic at the time of blood collection. We also used a control group composed of healthy individuals with negative epidemiology (n = 50). Blood samples were collected, in which we performed serology, cultures, microscopic analysis (optical and electron) and polymerase chain reaction (PCR) for different microorganisms (Mycoplasma spp, Chlamydia spp and Borrelia spp). In addition, a preliminary study was conducted by PCR for Borrelia spp in 47 samples of ticks from risk areas at Espirito Santo State (being 17 Rhipicephalus microplus and 30 Rhipicephalus sanguineus), 27 cattle and 26 horses, being these animals from the Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. The results showed that BYS is not a zoonosis caused by a set of microorganisms as initially thought, but by Borrelia burgdorferi sensu lato. These findings were possible after employing new primers that are able to amplify portions of the main genes involved in the synthesis of the Borrelia flagellar hook protein, called flgE. We confirmed positivity for the flgE in 6 patients from group B, 2 ticks, a cow, and a horse, which showed 99% homology with the gene of Borrelia burgdorferi flagellar hook protein (flgE) deposited in GenBank (L43849)...

Report on the unusual presence of latent microorganisms in animals: a risk to research and health of employees / Relato inusitado de micro-organismos latentes em animais: riscos à pesquisa e à saúde dos funcionários

Relata-se inusitado achado de micro-organismos, semelhantes às espiroquetas, móveis e de diferentes morfologias e tamanhos, identificados pela microscopia de campo escuro, no sangue de animais do Centro de Bioterismo da Faculdade de Medicina da USP. As bactérias não crescem em meios habituais de cultivo, são pouco coradas pelo Giemsa e derivados da prata, e as provas sorológicas e moleculares foram negativas para Borrelia e Leptospira. A microscopia eletrônica revelou presença de micro-organismos com morfologia de Mycoplasma e, devido à sua mobilidade, sugeriu-se a presença de Mollicutes do gênero Spiroplasma. Visualizaram-se micro-organismos com mesmas características em 15 dos 26 funcionários (57,6 por cento) do Centro de Bioterismo da FMUSP; contudo, exames clínicos e laboratoriais indicaram que os indivíduos estavam saudáveis. Estudos adicionais desenvolvidos na Disciplina de Reumatologia da FMUSP mostraram que, aproximadamente, 94 por cento dos pacientes com Síndrome Baggio-Yoshinari (SBY) e 20 por cento dos indivíduos normais também exibiam as mesmas estruturas identificadas no Centro de Bioterismo. A microscopia eletrônica realizada com amostras de pacientes com SBY mostrou bactérias que apresentam semelhanças com Mycoplasma, Chlamydia e Bacteroides. Visto que as sorologias e os testes moleculares foram negativos para estes contaminantes e com base em publicações da literatura médica, sugeriu-se que estes agentes infecciosos latentes fossem bactérias na sua apresentação L, que são definidas como bactérias despojadas de parede celular, assumindo, assim, morfologia de Mycoplasma, sendo, na maioria dos casos, inofensivas aos hospedeiros. Concluímos que os "espiroquetídeos" visualizados em animais e funcionários do Centro de Bioterismo seriam bactérias na forma L, não patogênicas, provenientes de contaminantes do meio ambiente, infecções regulares habituais ou oriundos de micro-organismos endógenos da flora saprofítica normal. Ao contrário, os...

We report the unusual finding of mobile spirochetal microorganisms with different morphologies and sizes, on dark-field microscopy of the blood of animals from the Vivarium of the Medical School of USP. The bacteria did not grow in common culture media, shows faint staining to Giemsa and silver-derived stains, and serologies and molecular tests were negative for Borrelia and Leptospira. Electron microscopy revealed the presence of microorganisms with Mycoplasma-like morphology and, due to its mobility, it was suggested that they represented Mollicutes of the genus Spiroplasma. Microorganisms with the same morphology were also observed in 15 out of 26 employees (57.6 percent) of the Vivarium of FMUSP; however, clinical and laboratorial exams indicated that those individuals were healthy. Additional studies undertaken at the Rheumatology Department of FMUSP demonstrated the presence of the same structures identified at the Vivarium in approximately 94 percent of the patients with Baggio-Yoshinary syndrome (BYS) and 20 percent of healthy individuals. Electron microscopy of the blood of BYS patients showed bacteria that shared similarities with Mycoplasma, Chlamydia, and Bacteroides. Since serologies and molecular tests were negative for those contaminants, and based on publications in the medical literature, it was suggested that those latent infectious agents were L-form bacteria, defined as cell wall deficient bacteria, assuming, therefore, Mycoplasma morphology and they are, for the most part, harmless to the host. We concluded that spirochetal microorganisms visualized in animals and employees of the Vivarium were non-pathogenic L-form bacteria from contaminants in the environment, regular infections, or endogenous microorganism from the normal saprophytic flora. On the other hand, spirochetal organisms identified in BYS, by preserving the capacity to invade cells in vitro, are potentially pathogenic and related to the etiology of BYS. We consider BYS as a ...